指标。
方法 采用免疫组化SABC法和图像分析与统计学处理系统，对18例猝死和18例非猝死组尸检心脏标本心肌
局部细胞核蛋白zif／268的累积情况进行研究。
结果 18例心性猝死心脏标本心肌局部有部分心肌细胞核呈阳性着
色，阳性表达率达100％ 。18例对照组标本仅2例心肌细胞核散在阳性。图像定量分析结果显示两组差异显著 结
论说明免疫组化染色法检测心肌细胞核Zif／268的表达有望成为急性心肌缺血死后诊断的一种有价值有意义的手段
【关键词】 心性猝死，Zif／268蛋白，免疫组化
【中图分类号1 13919．1；
R392．3
【文献标识码】A
【文章编号】 1007—9297(2004)O1—0049—02
Immunohistochemical study on Zif／268 Protein in the diagnosis of sudden Coronary Death．MA M eng yun．XU Xiao ^“ ．
LAJ Yue．Shenzhen Criminal Science~ Teehnology Institute ．51800l
【Abstractl Objective To investigate the changes of Zif／268 protein in myocardium in both groups of sudden coronary
death and the controls，and provide objective way[or postmortal diagnosis of ischemia． Method Immunohistochemical SABC
method，image analysis and statistical proces were used to observe alteration of Zif／268 protein in nuclei of cardiac myocytes
Results The myocardium in sudden coronary death group showed strong positive expression of Zif／268，the rate of positive ex—
pression was 100％ ．W hile only 2 of 18 in control group had positive sparsely in local myocardium ．Image analysis showed that
there was a significant difference between the two groups． Conclusion Fhe date shows that SABC — Zif／268 may become
one objective marker for diagnosis of ischemia．
【Key words】 sudden death Zif／268 protein Immunohistochemistry method
猝死死因的研究是法医病理学研究中非常活跃的领域之
一
。心肌急性缺血已引起众多学者的重视且进行了大量的研
究，但准确的诊断仍然没有彻底解决。Zif／268蛋白是一种含有
3个锌指状结构的转录因子，缺血可诱导其表达。本文对心性猝
死者心肌局部Zif／268蛋白进行免疫组化研究，为此类死亡案例
的死后鉴定探索一种灵敏特异的形态学指标。
材料和方法
一
、村料
(一)研究对象
36例心脏标本来源于中山医科大学法医病理学教研室
1994-1999年间的尸检案例，其中猝死案例18例，对照组18
例。
(二)实验主要试剂
兔抗Zif／268多克隆抗体(Santa Cruz)；
SABC试剂盒(博士
德)；
DAB底物显色试剂盒(博士德)；
二、方法
(一)切片
36例心脏标本取左心室前壁和侧壁各一块，10％ 福尔马林
固定，常规病理切片，连续切2张，分别用于HE染色和Zif／268
免疫组化染色。
(二)免疫组织化学及常规染色方法
常规病理连续切片2张，分别作HE染色和Zif／268免疫组
织化学染色。SABC— Zif／268免疫组织化学染色方法按照试剂
盒内说明书操作。以正常大鼠作对照，PBS取代一抗作阴性对
· 50 ·
照。心肌细胞核出现棕黄色产物为阳性结果。
(三)图像分析与统计学处理
应用VIPAS图像分析系统测量免疫组化产物阳性细胞百分
率P／A(％)和积分光密度(IOD)。具体操作为在低倍镜下找视
野后，调至400×，每张切片随机选10个视野测量，然后将上述
数值转化成阳性水平指数(PLI)：阳性水平指数=阳性细胞百分
率×积分光密度值。将图像处理所测得的数据，应用SPSS(6．0)
统计学软件对数据进行t检验。
结 果
一
、心脏肉眼检查结果
猝死组中冠状动脉粥样硬化管腔狭窄4级6例，3级4例，2
级3例，1级5例。其中并发新鲜血栓形成4例，斑块内出血7
、
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图I 心肌细胞核阳性Picture 1 Positive results were
showed in cardiac muscle ka~on
四、图像分析与统计学处理结果
猝死组阳性指数为10．36±2．59，对照组为3．72±1．02。t
值为2．85，P<0．01，两组相比显著差异。
讨 论
Zif／268又称egr一1(即早期生长反应基因)、NGFI A、Krox
一24等，其编码的蛋白是一种含有3个锌指状结构的转录因子，
能与核DNA某区段结合，诱发附近若干基因转录变化，从而抑
制细胞生长，还能作用于细胞周期( G1期，起调节细胞生长
和分化的作用，使细胞不过度生长。
在心肌缺血模型上发现缺血可诱导mRNA表达。且表达增
加是时间依赖性的。
本文用SABC免疫组化染色法观察了zif／268在猝死组和
对照心肌局部的变化情况。结果观察到：猝死组所有心脏均在
梗死区及其周围区域心肌出现阳性表达。Zif／268的表达机制目
前仍不完全清楚，可能与Zn离子等有关。而对照组仅有两例局
部少许心肌出现阳性染色，经图像分析处理发现两组有显著性
差异。作者认为免疫组化染色对诊断心肌缺血有重要意义，它
可为因心肌缺血所致的心脏性猝死提供客观的形态依据。可望
法律与医学杂志2004年第ll卷(第l期)
例，陈旧性心肌梗塞2例。对照组中有16例颅脑损伤，l例缢
死，1例电击死。其中仅有3例轻度冠状动脉粥样硬化管腔狭窄
(1级)。
二、常规HE 染色结果
猝死组中13例见心肌细胞坏死及炎性细胞浸润，其中5例
伴有陈旧性梗死灶。余5例见缺血区心肌细胞或／*n心肌间质
轻度水肿及心肌嗜伊红染色增强。对照组中未见明显心肌细胞
坏死及炎性细胞浸润。
三、Zif／268免疫组化学染色结果
猝死组心脏梗死区及其周围区域心肌细胞核出现zif／268
阳性反应(图1)。阳性表达率100％ 。对照组中有2例心肌组织
核有散在阳性(图2)，余为阴性。
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图2 心肌细胞核散在阳性Picture 2 Dispersed positive re
suits were showed in cardiac muscle karyon
以一种简便、快速、敏感而有高度特异性的诊断早期心肌缺血的
方法运用到法医学检案中。
参考方献
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(收稿：2003 01—08，修回：2003 09 10)